PAS (Periodic Acid Schiff) er en spesialfargemetode som benyttes for å påvise karbohydrater, som for eksempel i basalmembraner, slim og sopp. Fargemetoden benyttes blant annet til farging av glomerulikapillærene i nyrevev. Fortykket basalmembran kan indikere flere patologiske tilstander (1).
PAS fargemetode benytter to bestemte reaksjoner. Først skjer det en oksidasjon med periodsyre som danner aldehydgrupper fra karbohydratene til stede i vevet. Det dannes to aldehydgrupper fordi bindingen mellom karbonene i karbohydratet brytes, se figur 1. Det er viktig at aldehydene ikke oksiderer videre til karboksylsyre fordi schiff’s reagens er spesifikt for aldehyder og fargereaksjonen vil tapes. Aldehydene påvises videre med schiff’s reagens ved å fremkalle en kraftig magenta farge. Schiff’s reagens består av fargestoffet basisk fuschin (pararosaniline) og svovelsyrling. I kontakt med svovelsyrling mister basisk fuschin de konjugerte dobbeltbindingene fordi det legges til en svovelgruppe til fargestoffets sentrale karbonatom. Svovelsyrlingen opphever på denne måten den kromofore gruppen som gjør at schiff’s reagens blir fargeløst, se figur 2. I kontakt med aldehyder vil den kromofore gruppen gjendannes og vevet farges magenta, se figur 3 (2). Preparatet kontrastfarges i tillegg med hematoxylin.
Ved å benytte PAS vil vev som inneholder karbohydrater, som for eksempel glykoproteiner og nøytrale proteoglykaner, bli PAS-positive og farges magenta. Sure proteoglykaner, som finnes i enkelte typer slim, vil bli PAS-negative og farges svakt rosa (1). Kjerner farges blå.
Nyresnitt farget med PAS, 400x forstørrelse
Lær mer om hvordan ulike nyresnitt farget med PAS ser ut her.
Referanser
1: Bancroft, John D., Gamble, Marilyn. Theory and Practice of Histological Techniques. 6. utgave. Elsevier, Churchill Livingstone; 2008.
2: D. J. Cook and P. J. Warren. Cellular Pathology, an introduction to techniques and applications. Third edition. Bloxham, United Kingdom: Scion Publishing Ltd; 2015.